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ELISA檢測(cè)試劑盒的優(yōu)點(diǎn)和操作注意事項(xiàng)

更新時(shí)間:2023-09-07      瀏覽次數(shù):451

 ELISA檢測(cè)試劑盒的優(yōu)點(diǎn)和操作注意事項(xiàng)

ELISA就是酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定,是免疫學(xué)當(dāng)中的經(jīng)典試驗(yàn),是將可溶性的抗原或者是抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體特異性結(jié)合,進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測(cè)方法。

ELISA在抗體藥物研發(fā)的各個(gè)環(huán)節(jié)有著廣泛的應(yīng)用,從應(yīng)用目的來(lái)說(shuō)可以分為兩類(lèi):

生物大分子的定量:體內(nèi)抗體藥物的藥代動(dòng)力學(xué),藥效生物標(biāo)志物的含量檢測(cè)等。

親和力測(cè)定評(píng)價(jià)或者篩選:雜交瘤的滴度測(cè)定,噬菌體展示的篩選,抗體和細(xì)胞表面受體的親和力評(píng)價(jià)等。

ELISA的優(yōu)點(diǎn)如下:

靈敏度高:酶活性放大ELISA中,檢測(cè)的靈敏度遠(yuǎn)比RIA高。

特異性強(qiáng):由于作用檢測(cè)指示劑的酶與其底物的反應(yīng)有專(zhuān)一性,從而增加了該方法的特異性。

對(duì)儀器設(shè)備要求不高:測(cè)定成本低,在普通實(shí)驗(yàn)室便可進(jìn)行。

ELISA在抗體藥物研發(fā)的各個(gè)環(huán)節(jié)有著廣泛的應(yīng)用,從應(yīng)用目的來(lái)說(shuō)可以分為兩類(lèi):

物大分子的定量:體內(nèi)抗體藥物的藥代動(dòng)力學(xué),藥效生物標(biāo)志物的含量檢測(cè)等。

親和力測(cè)定評(píng)價(jià)或者篩選:雜交瘤的滴度測(cè)定,噬菌體展示的篩選,抗體和細(xì)胞表面受體的親和力評(píng)價(jià)等。

ELISA操作注意事項(xiàng):

試劑盒的選擇:選擇適合自己檢測(cè)范圍和靈敏度的試劑盒。

樣本處理:收集標(biāo)本前需有一個(gè)完整的計(jì)劃,需要清楚要檢測(cè)的成分是否足夠穩(wěn)定,對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,及時(shí)儲(chǔ)存在4°C備用。

防止反復(fù)凍融:標(biāo)準(zhǔn)品的倍比稀釋?xiě)?yīng)事先做好準(zhǔn)備。

規(guī)范操作:注意操作規(guī)范,槍頭勿刮劃預(yù)包被的孔底。

及時(shí)檢測(cè):提取后應(yīng)盡快進(jìn)行試驗(yàn),若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20°C保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。